1: Nom : Layton
Prénom : Hershel
Métier : Professeur
Grand spécialiste des énigmes en tout genre et des mystères les plus insondables, il est quelqu'un de très reconnu. Il ne sort jamais sans son haut-de- e.

2: Nom : Triton
Prénom : Luke
Métier : Apprenti
Jeune apprenti du professeur Layton, il accompagne ce dernier tout au long de ses aventures. Déjà très bon, il lui reste encore un long chemin afin de devenir un maître des énigmes. Il est également passionné par les animaux.

3: Nom : Reinhold
Prénom : Augustus
Métier : Baron
Il est l'auteur du mystère de la « Pomme D'Or », afin d'offir sa fortune à celui qui le résoudra en premier. Le riche homme qui aimait sa fille plus que tout, est tout comme sa femme, décédé.

4: Nom : Chelmey
Prénom : Inconnu
Métier : Inspecteur
Il a la particularité d'être un inspecteur de police très têtu et inflexible. Malgré qu'il s'énerve facilement, il reste un enquêteur compétent et redouté par tous les hors-la-loi de la région de Londres.

5: Nom : Paolo/Paul
Prénom : Don
Métier : Scientifique
Il se considère comme le rival du professeur Layton. C'est un passionné de musique.

6: Nom : Reinhold
Prénom : Flora
Métier : Aucun
Fille u*** d'une riche famille, elle reste très mystérieuse. Sa mère est décédée alors qu'elle était encore toute petite, mais a été élevée par son père, le baron Augustus Reinhold.

7: Nom : Reinhold
Prénom : Dahlia
Métier : Baronne
Elle est celle qui a contacté le professeur Layton afin de trouvé la « Pomme D'Or ». Veuve d'Augustus Reinhold, la seconde femme du baron est hautaine et autoritaire, mais aussi bienveillante, surtout quand elle s'occupe de Flora.

8: Nom : Inconnu
Prénom : Matthew
Métier : Majordome
Son dévouement envers la famille Reinhold est sans faille. Présent en tant que majordome depuis des années, il est aimable et réservé. Il subit souvent le caractère tyran*** de Dahlia.

9: Nom : Inconnu
Prénom : Ramón
Métier : Employé pour la famille Reinhold
Souvent appellé « le type aux lèvres violettes », il passe plus de temps au restaurant de Michel qu'au travail.

10: Nom : Reinhold
Prénom : Gordon
Métier : Inconnu
Pourtant très riche, le frère du baron est obsédé par ses dépenses. Il n'attire pas les faveurs d'une dame, ce qui l'angoisse fortement.

11: Nom : Reinhold
Prénom : Rupert
Métier : Inconnu.
Le fils de Gordon est la cible d'un crime à Saint-Mystère.

12: Nom : Inconnu
Prénom : Béatrice
Métier : Gérante d'hôtel.
La gérante du seul hôtel de Saint-Mystère est très gentille et très accueillante. Attention, elle tombe amoureuse de chaque homme qu'elle rencontre !

13:Nom : Inconnu
Prénom : Bruno
Métier : Ingénieur.
Ce personnage qui se cache derrière sa casquette bleue et sa longue barbe porte un drôle de sac. Que peut-il bien contenir ?

14: Nom : Reinhold
Prénom : Claudia
Métier : Aucun
Claudia est une femelle ? Et bien non, c'est un mâle ! Le chat de Dahlia aime rester au côté de la baronne, mais également d'aller se balader dans le village et de voler du poisson au marché.

1: Professeur Hershel Layton : Ses deux passions sont les énigmes et le bon thé. Il est très fier de sa voiture, la Laytonmobile. Bien qu'il soit professeur d'archéologie à l'Université de Gressenheller, c'est un escrimeur hors pair. Beaucoup se demandent ce qu'il cache sous son chapeau, mais il est le seul à connaître la réponse.

2: Luke : Luke se considère comme l'apprenti du professeur Layton. C'est un garçon gentil et sincère, mais comme beaucoup d'enfants de son âge, il peut parfois se montrer insolent. Le don qu'il possède avec les animaux s'est souvent révélé utile.

3: Flora Reinhold : Fille u*** d'une famille aisée, Flora suit Luke et Layton à bord du fameux Molentary Express. Durant son temps libre, elle aime cuisiner, bien que ses petits plats aient le malencontreux effet de donner la nausée.

4: Dr Schrader : Le docteur Andrew Schrader est un ami, mais aussi le mentor, du Professeur Layton. Il a mené des recherches sur le Coffret céleste et l'a finalement eu en sa possession. En ouvrant le Coffret, le docteur Schrader tombe dans un coma si profond que même l'inspecteur le croit mort. Par bonheur, ce n'est finalement pas le cas et sa guérison fera sans doute l'objet de nombreux articles dans des revues médicales.

5: Inspecteur Chelmey : Le simple nom de Chelmey suffit à faire trembler les voyous de Londres, mais cette réputation est peut-être exagérée au vu de ses capacités sur le terrain. Pour se remettre d'une enquête difficile, il compte sur les beignets préparés par sa tendre épouse.

6: Vladimir : Même si la rumeur veut que ce soit un vampire, Vladimir n'est en fait que le duc de Folsense. Il y a cinquante ans, il a été séparé de Sophia, la femme de sa vie, et il ne s'en est jamais vraiment remis. C'est aussi le frère aîné de Bélouga.

7: Katia : Katia est la fille de M. Anderson, un homme d'importance au village de Dropstone. Ils ne s'entendent plus très bien ces derniers temps. Katia se rend à Folsense pour délivrer un message de Sophia, sa grand-mère, à Vladimir, son grand-père.

8: Sam L'Eclair: Neveu de M. Bélouga, il est aussi le conducteur du Molentary Express, le train dans lequel voyagent Layton et Luke.

9. Nigel: Nigel est le seul domestique de la famille Van Herzen, il a tendance à oublier les in ations les plus importantes. Malgré son apparence, Nigel est en fait très gentil.

Melina et Janice

Professeur Hershel Layton: Ce professeur d'archéologie est un spécialiste des énigmes en tout genre. Il n'est pas détective mais aucun mystère ne peut lui résister bien longtemps. Ses aventures autour du monde pour résoudre des énigmes l'ont rendu très célèbre.

Luke Triton: L'assistant de Layton et son "fan numéro 1" autoproclamé. Il suit son idole partout et essaie d'en apprendre toujours plus avec le professeur. Il a un certain talent pour commu***r avec les animaux.

Remi Altava: La jolie assistante asiatique de Layton. Elle est très cultivée et est décrite comme une héroïne.

Janice Quatlan: Une célèbre cantatrice d'opéra qui a requis l'aide de Layton pour résoudre un mystère. Elle est réputée pour avoir une jolie voix et c'est elle qui est présumée être l'« Éternelle Diva ».

Oswald Wisler: L'antagoniste du film. C'est le pianiste de l'opéra de Crown Petone qui a piégé la salle. Il prétend que le vainqueur de son "jeu" se verra recevoir la vie éternelle.

Flora Reinhold: La riche héritière de la fortune des Reinhold qui a renoncé à l'argent pour suivre Layton et Luke. Son rôle dans le film est encore méconnu mais on peut la voir dans la 3e bande annonce se faire terroriser par Don Paolo. Ce qui contredit les évènements de Professeur Layton et l'Étrange village car l'action du film est sensée se dérouler trois ans avant qu'elle ne rencontre Layton, On peut supposer que cette scène du film est issue d'un flashback. Flora n'apparaît donc pas dans le premier film.

Don Paolo: Un brillant scientifique banni de l'académie en raison de ses mauvaises idées. Il considère Layton comme son rival. Son rôle dans le film est encore inconnu, mais on peut le voir dans la 3e bande annonce en train de sauter de Tower Bridge avec une de ses inventions.

Inspecteur Chelmey: L'homme le plus craint de tout Londres, les criminels s'enfuient rien qu'en entendant son nom. Chelmey est le principal détective de Scotland Yard et il rivalise souvent avec Layton pour savoir qui d'eux deux est meilleur détective. Son rôle exact dans le film n'est pas connu, mais on peut le voir dans la 3e bande annonce tenter d'appréhender Don Paolo au sommet de Tower Bridge, à Londres.

Professeur Andrew Shrader: Le professeur qui a enseigné à Layton la résolution des énigmes. Bien que non présent dans les trailers c'est sans doute lui qui explique à Layton ce qu'il sait sur l'ambroisie, la substance supposée accorder l'immortalité à celui qui la consomme.

Inspecteur Groski: Un policier à l'énergie inépuisable, sportif et très fier de sa coupe de cheveux, qui a bien connu Emmy par le passé.